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白蛋白检测试剂盒(溴甲酚紫微板法)可用于人血清样本中的白蛋白含量测定，该法操作简单、方法特异，既可手工操作，又可采用自动分析仪检测，对血清清蛋白的特异性比BCG法(溴甲酚绿法)要好，不易受时间和温度变化的影响。

在酸性环境下，白蛋白分子带正电荷，与带负电荷的溴甲酚紫(BCP)结合生成绿色复合物，在603nm处有吸收波，该复合物的吸光度与白蛋白浓度成正比，与同样处理的白蛋白标准比较，求得待测样品中白蛋白浓度。

• 严重脂血对测定有干扰，应加做标本空白予以校正。
  
• 如果没有酶标仪，也可以使用分光光度计测定，使用分光光度计测定蛋白浓度时，每个试剂盒可以测定的样品数量可能会显著减少。
  
• 本法线性范围在4～80g/L呈良好线性。
  
• CV可达0.45%，回收率可达99.3%～102%，平均回收率达100.5%。
  
• 该法测定正常样本的批间变异系数为6.3%。
  
• 经测定白蛋白标准溶液(40mg/mL)其吸光度减去空白吸光度差值在0.15～0.4之间；如果样品浓度过低，可能导致测定管吸光度与标准管吸光度之间差异不大，其避免方法为：增加标准品和(或)待测样品的量以提高差异性，可使标准品和(或)待测样品从1.4μL增加至5μL之间的量。其计算公式应调整为：白蛋白(g/L)=A测定/A标准×白蛋白标准液浓度(g/L)×(1.4/实际加入样品微升数)。
  
• 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
  
• 试剂开封后请尽快使用，以防影响后续实验效果。
  
• 本试剂盒仅用于科研领域，不适用于临床诊断或其他用途。

• 样本处理：血清、血浆样本直接取1.4μL检测；对于组织样本，按组织质量(g)∶提取试剂【生理盐水或PBS】(ml)=1∶9比例，加入9倍体积的提取试剂，冰浴下匀浆后，2500r/min离心10min，取1.4μL上清待检。
  
• 配制白蛋白标准溶液(40mg/mL)：取0.4mL提取试剂加入到0.1mL白蛋白标准储存液(200mg/mL)中，充分混匀即成，配制后可立即使用，可分装小份-20℃保存。
  
  • 待测蛋白溶解于什么样的溶液中，白蛋白标准也宜用相应的溶液稀释，例如待测蛋白溶解于蔗糖，亦用蔗糖溶液稀释白蛋白标准，一般也可以用0.9% NaCl或PBS作为稀释白蛋白标准品的溶液。
• 配制BCP试剂：按0.1mL BCP贮存液加入100mL BCP空白试剂混合即可，混合后应4℃避光保存，1个月有效。
  
• 白蛋白加样：按照下表设置各孔，溶液应按照顺序依次加入，并注意避免产生气泡。如果样品浓度过高，可以减少样品用量或适当稀释后再进行测定，样品的检测最好能设置平行孔。
  

  加入物(μL)	空白孔	标准孔	测定孔
  白蛋白标准配制液	1.4	-	-
  白蛋白标准溶液(40mg/mL)	-	1.4	-
  待检样品(血清、血浆、组织匀浆液)	-	-	1.4
  BCP试剂	280	280	280

• 白蛋白测定：顺序加入BCP试剂，并立即混匀，室温放置(30±3)s，以空白孔调零，酶标仪603nm处测定标准孔、测定孔的吸光度(即为A_标准、A_测定)。
  
• (备选步骤)当遇到脂血混浊，可设“样本空白孔”：取1.4μL待测样品加入280μL BCP空白试剂，以BCP空白试剂调零，读取”样本空白孔”吸光度，用测定孔吸光度减去样本空白孔吸光度后的净吸光度，计算白蛋白浓度。